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计较每10 ml(甲、乙液各5 ml)碱性酒石酸铜溶液

      多糖正在硫酸的感化下先水解成单糖,并敏捷脱水生成糖醛衍生物,然后取苯酚生成橙化合物。再以比色法测定。

      2. 碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜(CuSO4·5H2O)及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL。

      糖正在浓硫酸感化下,可经脱水反映生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可取蒽酮反映生成蓝绿色糠醛衍生物,正在必然范畴内,颜色的深浅取糖的含量成反比,故可用于糖的测定。

      2. 80%苯酚:80克苯酚(阐发纯沉蒸馏试剂)加20克水使之消融,可置冰箱中避光持久储存。

      ⑶ 含多量淀粉的食物:称取10.00~20.00g样品,置于250ml容量瓶中,加200ml水,正在45℃水浴中加热1h,并不时振摇(留意:此步调是使还原糖溶于水中,切忌温渡过高,由于淀粉正在高温前提下可糊化、水解,影响检测成果。)。冷后加水至刻度,混匀,静置,沉淀。吸收200ml上清液于另一250ml容量瓶中,慢慢插手5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液,加水至刻度,混匀,沉淀,静置30 min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。

      ②离心,转速3000转/分钟,共三次。第一次15分钟,取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最初滤液连结18毫升摆布。(测肝胰腺样品时,每次取上清液时应过滤。由于其脂肪含量大容易夹带残渣。)

      3. 样品溶液预测:吸收5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液,置于150 ml锥形瓶中,加水10 ml,插手玻璃珠2粒,节制正在2 min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品溶液,并连结溶液沸腾形态,待溶液颜色变浅时,以每两秒1滴的速度滴定,曲至溶液蓝色褪去,呈现亮为起点。若是样品液颜色较深,滴定起点则为兰色褪去呈现敞亮颜色(如亮红),记实耗损样液的总体积。(留意:若是滴定液的颜色变浅后复又变深,申明滴定过量,需从头滴定。) 当试样溶液中还原糖浓渡过高时应恰当稀释,再进行正式测定,使每次滴定耗损试样溶液的体积节制正在取标定碱性酒石酸酮溶液时所耗损的还原糖尺度溶液的体积附近,约正在10ml摆布。当浓渡过低时则采纳间接插手10ml样品溶液,免除加水10ml,再用还原糖尺度溶液滴定至起点,记实耗损的体积取标按时耗损的还原糖尺度溶液体积之差相当于10ml试样溶液中所含还原糖的量。

      必然量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量夹杂,当即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快取酒石酸钠反映,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。正在加热前提下,以次甲基蓝做为剂,用标液滴定,样液中的还原糖取酒石酸钾钠铜反映,生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全数被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定起点。按照样液耗损量可计较出还原糖含量。

      道理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。错误谬误:水样中的还原性物质能对糖的测定形成影响。

      1.制做尺度曲线:精确称取尺度葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,别离吸收0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后插手6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟当前于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操做为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得尺度曲线.样品含量测定:

      4. 样品溶液测定:吸收5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液,置于150 ml锥形瓶中,加水10 ml,插手玻璃珠2粒,正在2 min内加热至沸,快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液,然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定曲至起点。记实耗损样液的总体积,同法平行操做两至三份,得出平均耗损体积。

      (4)测按时按照光密度值确定取样的量。光密度值最好正在0.1——0.3之间。好比:小于0.1之下能够考虑取样品时取2克,仍取0.2ml样品液,如大于0.3能够减半取0.1ml的样品液测定。

      ⑵ 酒精性饮料:吸收100ml样品,置于蒸发皿中,用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,正在水浴上蒸发至原体积1/4后,移入250ml容量瓶中,加水至刻度。

      ⑴ 乳类、乳成品及含卵白质的食物:称取约2.50~5.00g固体样品(吸收25~50ml液体样品),置于250 ml容量瓶中,加50 ml水,摇匀。边摇边慢慢插手5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液,加水至刻度,混匀。静置30 min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。(留意:乙酸锌可去除卵白质、鞣质、树脂等,使它们构成沉淀,颠末滤除去。若是钙离子过多时,易取葡萄糖、果糖生成络合物,使滴定速度迟缓;从而成果偏低,可向样品中插手草酸粉,取钙连系,构成沉淀并过滤。)

      9. 糖尺度溶液:精确称取1.0526g纯蔗糖,用100ml水消融,置于具塞三角瓶中加5ml盐酸(1+1),正在68℃~70℃水浴中加热15min,放置至室温定容至1000ml,每ml尺度溶液相当于1.0mg糖。

      (1)此法简单、快速、博牛彩票,活络、反复性好,对每种糖仅制做一条尺度曲线)制做尺度线宜用响应的尺度多糖,如用葡萄糖,应以校正系数0.9校正μg数。

      2. 标定碱性酒石酸铜溶液:吸收5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液,置于150ml锥形瓶中(留意:甲液取乙液夹杂可生成氧化亚铜沉淀,应将甲液插手乙液,使起头生成的氧化亚铜沉淀沉溶),加水10 ml,插手玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9 ml葡萄糖尺度溶液或其他还原糖尺度溶液,曲至溶液兰色刚好褪去为起点,记实耗损的葡萄糖尺度溶液或其他还原糖尺度溶液总体积,平行操做三份,取其平均值,计较每10 ml(甲、乙液各5 ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量(mg)。(留意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成本来的蓝色,所以滴定过程中必需连结溶液成沸腾形态,而且避免滴按时间过长。)

      ④定容取样。水浴后,用流水冷却后插手2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸收0.2 ml的样品液,以蒸馏补至2.0ml,然后插手6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟当前于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以尺度曲线计较多糖含量。

      错误谬误:,分歧的糖类取蒽酮试剂的显色深度分歧,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。

      6. 葡萄糖尺度溶液:精确称取1.0000g颠末96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖,加水消融后插手5ml盐酸,并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖(注:加盐酸的目标是防腐,尺度溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制)。

      ①取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于10毫升离心管中,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液,反复3次。最初一次将残渣一路到入离心管。留意:总的溶液不要超出10毫升。(既不要超出离心管的容量)。

      样品2.0 mL加5.0 mL蒽酮试剂,混匀,然后水浴煮沸10 min,取出冷却至室温,正在620 nm处测定其吸光度,按照尺度曲线计较水样中糖的浓度。(标线以葡萄糖为标样)

      道理 将样液取必然量过量的碱性酒石酸铜溶液反映,还原糖将二价铜还原为氧化亚铜,颠末滤,获得氧化亚铜沉淀,插手过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化消融,而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐,用高锰酸钾尺度溶液滴定所生成的亚铁盐,按照高锰酸钾溶液耗损量可计较出氧化亚铜的量,再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原糖量,即可计较出样品中还原糖含量。

      样品经除去卵白质后,正在加热前提下,以次甲基蓝做剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖尺度溶液标定碱性酒石酸铜溶液),按照样品溶液耗损体积计较还原糖量。

      ⑷ 汽水等含有二氧化碳的饮料:吸收100ml样品置于蒸发皿中,正在水浴上除去二氧化碳后,移入250ml容量瓶中,并用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀后备用。(留意:样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖尺度液的浓度。)

      (3)对杂多糖,阐发成果可按照各单糖的构成等到次要组分单糖的尺度曲线的校正系数加以校正计较。

      3. 碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠取75g氢氧化钠,溶于水中,再插手4g亚铁氰化钾,完全消融后,用水稀释至1000 ml,储存于橡胶塞玻璃瓶内。

      糖正在浓硫酸感化下,可经脱水反映生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可取蒽酮反映生成蓝绿色糠醛衍生物,正在必然范畴内,颜色的深浅取糖的含量成反比,故可用于糖的测定。

      糖正在浓硫酸感化下,脱水构成的糠醛和羟甲基糠醛能取苯酚缩合成一种橙红色化合物,正在10-100mg范畴内其颜色深浅取糖的含量成反比,且正在485nm波长下有最大接收峰,故可用比色法正在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方式简单,活络度高,尝试时根基不受卵白质存正在的影响,而且发生的颜色不变160min以上。

      该法的特点是几乎能够测定所有的碳水化合物,不单能够测定戊糖和己糖,并且能够测所有的寡糖类和多糖类,此中包罗淀粉、纤维素等(因反映液中的浓硫酸能够把多糖水解成单糖而发生反映。所以,用蒽酮法测出的碳水化合物含量,现实上是溶液中全数可溶性碳水化合物总量。正在没有需要详尽划分各类碳水化合物的环境下,用蒽酮法能够一次测出总量。此外,分歧的糖类取蒽酮试剂的显色深度分歧,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。故测定糖的夹杂物时,常因分歧糖类的比例分歧形成误差,但测定单一糖类时,则可避免此种误差。

      糖正在浓硫酸感化下,脱水构成的糠醛和羟甲基糠醛能取苯酚缩合成一种橙红色化合物,正在10-100mg范畴内其颜色深浅取糖的含量成反比,且正在485nm波长下有最大接收峰,故可用比色法正在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方式简单,活络度高,尝试时根基不受卵白质存正在的影响,而且发生的颜色不变160min以上。